产品货号:
CZ064
中文名称:
链霉亲和素磁珠(2.8μm)
英文名称:
2.8μm BalBeads Streptavidin
产品规格:
1ml|10ml|100ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
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BalBeads Streptavidin采用蛋白偶联技术将链霉亲和素共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球,粒径均一、形貌规整,有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
链霉亲和素-生物素(SA-Biotin)系统具有极高的结合亲和力(Kd=10-15),在生物领域具有广泛的应用。
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链霉亲和素-生物素(SA-Biotin)系统具有极高的结合亲和力(Kd=10-15),在生物领域具有广泛的应用。
名称 | 链霉亲和素磁珠 | ||||
货号 | CZ016 | CZ017 | CZ063 | CZ015 | CZ064 |
粒径 | 1μm | 2μm | 5μm | 300nm | 2.8μm |
游离生物素 (pmol/mg磁珠) | 1100 | 1000 | 800 | N/A | N/A |
生物素化单链寡核苷酸 (24nt)(pmol/mg磁珠) | 500 | 400 | 400 | 450 | 450 |
生物素化IgG (μg/mg磁珠) | 20 | 20 | 15 | 15 | 15 |
磁珠浓度 | 10mg/mL | ||||
磁珠表面 | 亲水基团 | ||||
保存溶液 | 1×PBS,含0.1%(w/v)BSA,0.1%(v/v)proclin-300 | ||||
保存条件 | 2~8℃,有效期2年 |
- 免疫检测、分离蛋白、细胞分选等
BalBeads Streptavidin可特异性地结合生物素化抗体或抗原,作为免疫检测、ELISA等固相反应载体,或用于分选细胞等。 - 分离核酸、制备核酸探针等
BalBeads Streptavidin可特异性地结合生物素化的核酸探针,广泛应用于DNA、RNA的杂交实验。 - DNA-蛋白质相互作用研究
BalBeads Streptavidin可特异性地结合生物素化的靶点DNA或RNA片段,可用于蛋白质与核酸相互作用研究。
- 应避免对磁珠进行冷冻等操作。
- 为减少磁珠损失,每次磁性分离的时间应不少于1min。
- 从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。
- 建议使用质量好的移液器吸头和反应管,避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
- 生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
- 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍,以使磁珠饱和。
- 如需生物素与SA磁珠分离,可采用:
方法一:0.1% SDS,煮沸5min;
方法二:pH=8.2,含95%甲酰胺的10mM EDTA中,65℃ 5min或90℃ 2min。脱落率95%。 - 本产品仅供研究使用。
- 使用前准备
- 缓冲液:以下为常用的缓冲液成分,用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
- Buffer I(适用于结合生物素化核酸):10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM EDTA,1M NaCl,0.01%~0.1% Tween-20。
- Buffer II(适用于结合生物素化抗体/蛋白):PBS,pH7.4,含0.05% Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1% BSA。
- 化学发光Washing buffer:用户根据需求配制洗液,使用时平衡至室温。
- 磁性分离器。
- 漩涡振荡器
- 旋转混合仪
- 移液器及吸头
- 合适的离心管
- 缓冲液:以下为常用的缓冲液成分,用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
- 结合生物素化核酸
- 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上,静置1min(此操作后续简称为磁性分离),用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。 - 加入1mL Buffer I到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤B.1取用磁珠体积大于1mL时,加入与磁珠体积相同的Buffer I。 - 重复“步骤B.2”一次。
- 加入500μL的用Buffer I稀释的生物素化核酸(使磁珠浓度为2mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合30min。
- 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
- 按“步骤B.2”的方法洗涤磁珠三次。
- 根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
- 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度,计算结合到磁珠上的核酸量﹝(反应前浓度-反应后浓度)×反应溶液体积﹞。
- 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上,静置1min(此操作后续简称为磁性分离),用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
- 结合生物素化抗体/蛋白操作流程
- 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。 - 加入1mL Buffer II到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤C.1取用磁珠体积大于1mL时,加入与磁珠体积相同的Buffer II。 - 重复“步骤C.2”两次,共洗涤三次。
- 加入1mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白(使磁珠浓度为1mg/mL),充分振荡重悬磁2.将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合60min。
- 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
- 按“步骤C.2”的方法洗涤磁珠五次。
- 根据后续实验的要求,加入Buffer II或其他合适的缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
- 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
- 磁微粒化学发光免疫诊断操作流程
- 调整磁珠至合适浓度(建议0.8mg/ml),将磁珠置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取50μL磁珠至96孔板中,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
- 每孔加入100μL生物素化捕获抗体,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
- 每孔加入200μL的Washing buffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
- 每孔加入50μL待测物标准品或待测样本,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
- 每孔加入200μL的Washing buffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
- 每孔加入100μL酶标记抗体,充分震荡重悬磁珠,37℃恒温箱中孵育15min后,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
- 每孔加入200μL的Washing buffer,充分震荡重悬磁珠,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板,该步骤再重复2次,共洗涤3次。
- 每孔加入150μL的底物液,充分震荡重悬磁珠,避光孵育5min。
- 将96孔板放入化学发光仪读数,并进行相应数据处理。
- 调整磁珠至合适浓度(建议0.8mg/ml),将磁珠置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取50μL磁珠至96孔板中,磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下96孔板。
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